Kód: NAS0200
Legionella pneumophila kvalitatív kimutatása real-time PCR módszerrel
|
Kiszerelés
NAS0200L 50 reakció
NAS0200C 100 reakció
ALKALMAZÁS
A DiaLP kit a folyadék minták Legionella pneumophila szennyezettségét és fertõzöttségét a jellemzõ mikrobiális kromoszómális DNS kvalitatív meghatározásával mutatja ki. A DiaLP kit a leggyakrabban vizsgált Legionella pneumophila törzsekkel azonos patogén Legionella DNS kimutatására szolgáló teszt. A bakteriális DNS kimutatása real-time PCR módszerrel történik.
AZ ALKALMAZÁS ELVE
A PCR folyamat mindkét lépése meghatározott hõmérsékleten történik. Elsõ lépés a DNS kezdeti denaturálása, a második lépés a degenerált primerek által irányított amplifikáció. Az irányított amplifikáció a denaturation-annealing-elongation szakaszok ciklikus ismétlõdése. A PCR ciklusok terméke a megsokszorozott DNS. A PCR reakciót a kitben található specifikus primer-probe oligonukleotid párok irányítják. Ezek az oligonukleotid párok a Legionella pneumophila egyedi patogén markerét (patogenitás faktor - macrophage infectivity potentiator - MIP) és a konzervált 16s rRNS régiót kódoló szekvenciákra specifikusak. A struktúrgén (Open Reading Frame - ORF) és a promoter 5 régióhoz kapcsolódó primer szekvenciák nyomán a struktúrgén annak 5 szabályozó elemeivel együtt sokszorozódik. Ez az amplifikációs rendszer a mikróba fajspecifitást és virulenciát meghatározó kromoszomális DNS-régiókat egy PCR reakcióban mutatja.
KIT JELLEMZÕK
A DiaLP kit a patogén, MIP faktort kódoló Legionella pneumophila (LP) specifikus, kvalitatív kimutatására alkalmas reagens készlet. Az alábbiakban részletezett alkalmazás LightCyclerõ 2.0 (Roche Applied Science), LineGene 9660 (BIOER) és Agilent Mx3005P (Stratagene, Agilent Technologies Division) PCR készülékeken történt.