Kód: NAS0300
Methicillin rezisztens Staphylococcus aureus kvalitatív kimutatása real-time PCR módszerrel
|
Kiszerelés: NAS0300L 50 reakció, NAS0300C 100 reakció
ALKALMAZÁS
A közegészségügyi laboratóriumokban alkalmazott DiaMRSA kit klinikai minták methicillin rezisztens Staphylococcus aureus (MRSA) szennyezettségét a mikrobiális kromoszóma DNS kvalitatív kimutatásával igazolja. MRSA jelenléte különösen veszélyes a hospitalizációval társuló (nosocomialis, hospital acquired-HA MRSA) és a közösségekben (community acquired-CA MRSA) fellépõ fertõzésekben. Kórházi betegeknél az egészséges átlag-populációhoz képest jóval nagyobb kockázatot jelentenek a nyílt sebek, az invazív gyógyászati segédeszközök valamint az ápolt személy gyenge immunháztartása. DiaMRSA kittel az elõdúsított, vagy szelektíven izolált minta methicillin rezisztens Staphylococcus aureus DNS tartalma real-time PCR módszerrel analizálható.
AZ ALKALMAZÁS ELVE
A PCR folyamat mindkét lépése meghatározott hõmérsékleten történik. Elsõ lépés a DNS kezdeti denaturálása, a második lépés a degenerált primerek által irányított amplifikáció.
Az irányított amplifikáció a denaturation-annealing-elongation szakaszok ciklikus ismétlõdése. A PCR ciklusok terméke a megsokszorozott DNS. A PCR reakciót a kitben található specifikus primer-probe oligonukleotid párok irányítják Ezek az oligonukleotid párok a methicillin rezisztens Staphylococcus aureus PBP2a rezisztencia faktort (mecA) és a konzervált 16s rRNS régiót kódoló szekvenciákra specifikusak. A struktúrgén (Open Reading Frame - ORF) és a promoter 5 régióhoz kapcsolódó primer szekvenciák nyomán a struktúrgén annak 5 szabályozó elemeivel együtt sokszorozódik. Ez az amplifikációs rendszer a mikróba fajspecifitást és virulenciát meghatározó kromoszomális DNS-régiókat egy PCR reakcióban mutatja.
KIT JELLEMZÕK
A DiaMRSA kit a patogén PBP2a (mecA) faktort kódoló Staphylococcus aureus (MRSA) specifikus, kvalitatív kimutatására alkalmas reagens készlet. Az alábbiakban részletezett alkalmazás LightCyclerõ 2.0 (Roche? Applied Science), Agilent Mx3005P (Stratagene, Agilent Technologies Division), LineGene 9660 (BIOER) és Rotor-Gene Q (Qiagen, Rotor GeneTM 6000, Corbett) PCR készülékeken történt.